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逆转录聚合酶链反应是检测慢性性白血病(CML)细胞产生的
作者:暂无 来源:国外医学(内科学分册) 年份:1999 文献类型 :期刊文章 关键词: 慢性性白血病  逆转录  链反应  聚合酶  RT  PCR  白血病祖细胞  体外净化  BCR  ABL  染色体异常  CD34+细胞 
描述:施十分必要。病人和方法7例CML(4男,3女),5例初诊,2例经羟基腺及a-干扰素治疗,病人均为Ph+而无其它染色体异常。方法:①来骨髓、血液,分离单个核细胞及CD34+细胞,后者的含量为89±9%。经集落培养后,检测祖细胞、长程培养启动细胞(LTC-IC)。@结合标准G带和/或Q带技术进行单集落核型(SCK)分析。③抽提总RNA,逆转录后分别进行首次PCR。为防止假阳性结果,同时设阴性对照:水、正常人RNA、无cDNA及K562细胞系阳性对照,并作一系列稀释以定量检出该法所需的最低细胞数。结果和讨论共获取204个集落,个别较小。SCK或RT-PCR可评估的集落数分别为74±16%和86±16%;两种方法均能评估的集落数为67±19%,集落中有97±5%为Ph+和BCR-ABL(+),4%为Ph+但BCR-ABL(-...